Poly
- Dite en défaut d’anticorps
- Tous les antigènes, quel que soit leur taille

SDS page

Les SDS
- Détergeant ionique qui rompt les liaisons non covalentes des protéines activés
- Se lie très fortement aux protéines en leur conférant une forme de baignoire
- Apporte une très forte charge électrique à la protéine

Séparation des protéines en fonction de leur masse moléculaire, par effet de filtration sur gel
La mobilité électro-phorétique de nombreuses protéines en gel de polyacrylamide de SDS est
inversement proportionnelle à leur masse

Application SDS page : détermination des … moléculaires
- De protéines normales
- Des sous unités de protéines désactivés par le SDS

Détection des bandes de gel +/- quantification par coloration
- Bleu de ccomessie
- Amidoschwartz
- Rouge ponceau

Intégration des bandes sèches au …
Application électrophorèse des protéines sériques
Pour immune-transfert = western blot (cf III 2)
Electrophorèse des protéines sériques : voir poly

II –

Les techniques immunochimiques sont très sensibles et spécifiques

Fondées sur la spécificité des Ac pour leurs protéines cibles
- Ac polydoneur
- Ac monodoneur

Principe : détection directement de la protéine en la faisant précipiter avec ces Ac ou indirectement

par dosage immunologique

- Introduction du gel dans une plaque verticale
- Dépôt des différentes solutions de protéines dans les puis de gel (en haut)
- Fermer la chambre du gel avec un couvercle
- Appliquer une différence de potentiel

La protéine chargée migre vers l’anode située dans la partie inférieure du gel

Dans électrophorèse sur gel la migration dépend
- De la charge de la protéine
- De sa taille
- Du support (gel plus ou moins réticulé, papier…)

Electrophorèse en gel = inverse de la filtration sur gel

Gel =billes de la filtration sur gel mais imperméable aux solutions protéiques. Les molécules les plus
petites se déplacent plus rapidement que les molécules les plus grosses

Séparation de solutés chargés par migration dans un champ électrique

Les protéines ionisées, donc chargées, placées dans un champ électrique se dirige vers l’électrode designe opposé à leur charge

La vitesse de migration est fonction
- De l’intensité du champ électrique
- De la charge globale de la protéine
- Du complexe de friction f / dépend de la masse de la molécule et de la viscosité ou non du
milieu (inversement proportionnel)
V = Ez/f