Protéines de la capside constituant le virus = Élément antigénique essentiel.
Préparation : Protéines de la capside produites en grande quantité (par des cellules de levure recombinées) et utilisées pour préparer le vaccin.
Autre procédé : Utilisation de la vaccine (variole de la vache, inoffensive pour l’Homme) dont on remplace certains gènes par d’autres immunisant contre d’autres maladies.
Isolation des cellules possédant l’allèle défectueux. Copie de l’allèle normal insérée dans l’ADN viral -> Celles défectueuses infectées par ces virus.
ADN viral portant le gène normal s’insère dans chromosome de la cellule déficiente.
Cellules contenant l’allèle normal mises en culture : Réinjection de ces dernières et dissipation des symptômes.
Remplacer un gène défectueux par un normal. Problèmes techniques et éthiques pour les organismes développés.
Principal : Ciblage du gène défectueux (si gène introduit se fout n’importe où : Divers dommages).
Distinction entre thérapie des cellules germinales (proscrite chez l’Homme : Si problème, toute la descendance atteinte) et des cellules somatiques (convient pour les maladies causées par la mutation d’un seul gène.
Ex : Maladies sanguines).
Fabrication in vitro de protéines n’existant naturellement qu’en petites quantités. Ex : Insuline (pour les diabétiques), somatostatine, interféron, … Médicament.
Diagnostic de certaines maladies génétiques avant apparition de symptômes et même dès le début du développement de l’embryon (sur liquide amniotique ou villosités choriales).
Basé sur l’usage d’une sonde radioselected. Gène lié à la sonde isolé, séquencé et comparé au gène normal.
Diagnostic des maladies génétiques précoces pose des problèmes éthiques.
L’ADN humain contient 90 à 95% de régions répétitives de longueur variable différant fortement d’un individu à l’autre : Empreinte génétique unique.
Pour la déterminer, besoin de cellules quelconques.
ADN extrait et coupé en fragments grâce aux enzymes de restriction qui sont séparés par électrophorèse : Profil.
Un individu a hérité une moitié des fragments de chacun de ses parents : Établissement des filiations parentales.
Déterminer la suite nucléotidique d’un fragment d’ADN correspondant à une partie ou à la totalité d’un gène.
Ensemble des clones recombinants constituent une banque.
Deux types : Génomiques (Étude de l’ensemble du génome d’une espèce ou d’une cellule, ADN codant et non-codant) et d’ADNc
12 (ADN codant seulement. Banque contenant une copie de chaque ARNm présent dans une cellule).
Recours aux antibiotiques pour distinguer les bactéries recombinées (ces dernières possédant un plasmide ayant toujours au moins un gène de résistance).
(ou PCR : Polymerase Chain Reaction) (depuis +/- 1990) Réalise un « emballement » de la réplication d’ADN : Plusieurs millions de copies en quelques heures.
Ligases : Enzymes recollant les bouts collants. Insertion d’un fragment d’ADN d’un organisme dans un autre différent mais étape intermédiaire : Vecteur génétique (virus ou plasmides utilisés car pénétrant naturellement dans les bactéries).
Insertion : Ouverture avec enzyme de restriction, insérer ADN et stabiliser avec ligase.
Ensuite : Arroser bactéries avec ces virus/plasmides, qui pénétreront en elles : Bactéries transformées ou recombinées.
Autres méthodes d’insertion : Microinjection (prendre un bout d’ADN et l’introduire directement, peut abîmer la cellule et pas efficace à 100%), canon à particules (bombarder une culture avec les gènes à introduire, peut abîmer le gène et la culture).
